Tabla de contenido
- 1 ¿Qué es la transformación bacteriana?
- 2 ¿Cómo se hacen las bacterias competentes?
- 3 ¿Cómo se seleccionan las celulas transformadas?
- 4 ¿Qué es una célula competente y cómo se generan?
- 5 ¿Cómo pueden las bacterias recolectar ADN de otros organismos?
- 6 ¿Cómo suceden las mutaciones en las poblaciones bacterianas?
¿Qué es la transformación bacteriana?
La transformación genética de bacterias es un procedimiento de laboratorio por el cual se introduce material genético a una bacteria. Existen otros procesos de inserción del material genético, que dependiendo del organismo receptor y el mecanismo, algunos reciben nombres como transfección o transducción.
¿Cómo funciona la selección de colonias blanca y azul?
Las colonias blancas corresponden a las células transformadas con el vector que lleva un gen de la β-galactosidasa no funcional por inserción de un fragmento de DNA dentro del mismo. Finalmente, la placa C sólo contendrá colonias azules pues portan el vector intacto con una β-galactosidasa funcional.
¿Cómo se hacen las bacterias competentes?
Procedimiento de las células químicamente competentes
- Realice un subcultivo bacteriano durante la noche 0.5 mL/50 mL en un matraz con LB.
- Cresca a 0.5 – 0.7 A600.
- Centrifugar 8000 rpm 5 min en tubos para centrífuga estériles.
- Resuspender en 5 ml de CaCl2 30 mM frío y resuspenda en un vortex .
¿Qué es la reproduccion por transformación?
Transformación : En la transformación, las bacterias recogen partes de ADN de su entorno. Transducción : En la transducción, los virus que infectan bacterias llevan el ADN de una bacteria a otra.
¿Cómo se seleccionan las celulas transformadas?
Las células transformadas serán seleccionadas utilizando placas de LB con ampicilina. La presencia de colonias bacterianas azules demostrará la expresión del gen específico β-galactosidasa para el fenotipo Lac+ en las bacterias transformadas.
¿Cómo calcular la eficiencia de transformación?
La eficiencia de transformación (ET) es el número de unidades formadoras de colonias producidas por transformar 1 µg de plásmido de ADN en un volumen conocido de células competentes….Basado en esta información, calculas:
- Colonias = 250.
- µg of DNA = 0.00001 (or 10 pg = 0.00001 ug)
- Dilución = 10/1000 x 50/1000 = 0.0005.
¿Qué es una célula competente y cómo se generan?
Las células químicamente competentes son células que se hicieron competentes con un tratamiento con sal seguido de una etapa de choque térmico. Este proceso permeabiliza la membrana celular, permitiendo la entrada del plásmido.
¿Cómo se transfieren los genes bacterianos a otras especies?
Los genes bacterianos se transfieren normalmente a los miembros de la misma especie, pero en ocasiones también puede ocurrir la transferencia a otras especies. La transformación es la transferencia génica resultante de la captación por una célula recipiente del ADN íntegro de una célula donante.
¿Cómo pueden las bacterias recolectar ADN de otros organismos?
Puntos más importantes: Las bacterias pueden recolectar ADN de otros organismos en un proceso llamado transformación. La transformación es un paso clave en la clonación de ADN. Ocurre después de los tratamientos de digestión con enzimas de restricción y ligación y transfiere plásmidos recién hechos a las bacterias.
¿Por qué las bacterias se pueden utilizar como fábricas de proteínas?
En otros casos, las bacterias se pueden utilizar como fábricas de proteínas. Si un plásmido contiene las secuencias de control adecuadas, se puede inducir a las bacterias a expresar el gen que contienen al agregar una señal química. La expresión del gen conduce a la producción de ARNm que se traduce en proteína.
¿Cómo suceden las mutaciones en las poblaciones bacterianas?
En las poblaciones bacterianas las mutaciones suceden constantemente debido a errores durante la replicación. Si hay alguna ventaja selectiva de la mutación (por ejemplo, resistencia a los antibióticos), el mutante se convertirá rápidamente en el principal componente de la población debido a la alta tasa de crecimiento de la bacteria.
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